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人可溶性E选择素(sE-selectin)检测指南 - 尊龙凯时品牌解析

发布时间:2025-03-01   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒仅限于科学研究用途,不应用于医学诊断。尊龙凯时人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒的使用说明如下:

人可溶性E选择素(sE-selectin)检测指南 - 尊龙凯时品牌解析

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤后,采用底物TMB进行显色反应。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,并在酸性条件下转化为最终的黄色。显色的深浅与样品中adropin(AD)浓度成正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样品浓度。

样本收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免在操作过程中刺激任何细胞。血液收集后,以3000转/min离心10分钟,迅速小心地分离血清和红细胞。

2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝剂,并以3000转/min离心30分钟以取上清。

3. 细胞上清液:通过3000转/min离心10分钟去除颗粒物和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合,捣碎后以3000转/min离心10分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后未及时检测,请分装成一次用量并保存在-20℃的环境中,避免反复冻融。解冻时应在室温下进行,确保样品均匀充分解冻。

操作注意事项

本试剂盒中标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备

对于20×洗涤缓冲液的稀释,请使用蒸馏水按1:20的比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

洗板方法及操作步骤

结果判断:在Excel中绘制标准曲线,将标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,绘制线性回归曲线。根据曲线方程计算各个样本的浓度值。

免责声明

使用尊龙凯时人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒的过程中,用户需遵循相关规定并自行承担由此产生的一切后果。