产品及特点

尊龙凯时推出的检测试剂盒采用探针法荧光定量PCR原理，具有以下独特优势：

即开即用

用户仅需提供样品DNA模板，方便迅速，立即可进行实验。

高灵敏度

经过优化的引物及其他组分，使得此产品具备优异的敏感性，能够准确检测目标DNA。

阳性对照

本产品配备阳性对照，帮助用户轻松区分假阴性样品，保证测试结果的可靠性。

特异性设计

引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，确保不会与其他生物样本的DNA发生交叉反应。

定性与定量检测

本试剂盒可以同时用于定性和定量检测，定量检测时的线性范围至少可达5个数量级。

运动范围

本产品支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应，方便多次实验操作。

科研使用限制

请注意，本产品仅限于科研用途。

使用方法

以下是具体操作步骤：

一、DNA提取

使用自选方法提取纯化样品DNA。本试剂盒与市面上的大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

由于阳性对照浓度较高，请在独立区域内进行稀释以避免污染：

1. 标记6个离心管，依次标记为7，6，5，4，3，2。
2. 在每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10⁸拷贝/μL的阳性对照，震荡1分钟，得到1×10⁷拷贝/μL的标准曲线样品，置于冰上待用。
4. 依次进行下一步稀释，直到得到6个稀释度的标准曲线样品，置于冰上待用。
5. 如果不制作标准曲线，仅需将阳性对照稀释至1×10⁵拷贝/μL即可。

三、试剂配制

若有N个待检样品，准备N+2个qPCR管，向各PCR管中添加所需成分，并转移至样本准备区。

四、添加模板

向qPCR管中分别加入2μL模板，添加顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板及阳性对照，离心30秒后立即进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放置于PCR扩增仪器中，根据详细说明书设置扩增程序。

六、结果分析

1. 如制作标准曲线，则以阳性对照浓度的log值为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线，以此推算样品DNA浓度。
2. 若未制作标准曲线，按照以下标准判定结果：阳性对照Ct值<30，阴性对照Ct值38或无Ct值，样本检测结果Ct值<35判断为阳性，抑或在35-38之间需复检。

运输及保存

本产品应低温运输，保存于-20℃，有效期为一年。阳性对照需单独存放，以防污染其他试剂。

选择尊龙凯时，让您的检测更精准、更可靠！