尊龙凯时培养条件:气相环境为95%空气与5%二氧化碳,温度保持在37℃。该细胞系于1972年由GiardDJ从一名58岁白人男性的肺癌组织中建立,属于经典的人肺癌细胞系,主要来源于人类肺腺癌(Adenocarcinoma of the Lung)肿瘤组织。现由美国典型培养物保藏中心(ATCC)提供,广泛应用于肺癌研究、药物开发及分子机制探讨。
传代方法首次建议采用1:2比例进行传代,传代频率为每2天更换培养基。建议同时购买完整培养方案,能享受特别优惠。收到细胞后应及时对其进行处理,将细胞培养至良好状态后加入完全培养液,并确保培养瓶密封良好,以保障运输过程中细胞的完整性。
在细胞处理过程中,应特别注意以下步骤:对于贴壁细胞,首先去除培养上清,并用不含钙、镁的PBS轻洗1-2次;接着加入约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,观察细胞是否大部分变圆并脱落,随后以完全培养基终止消化。通过轻轻吹打使细胞完全脱落,并将细胞悬液转移至15ml离心管,1000RPM离心5分钟后弃去上清,再加入1-2ml完全培养基以重悬细胞。最后,将细胞悬液分瓶(比例如1:2),并补充新培养基至5-8ml,置于37℃、5%CO2细胞培养箱中继续培养。
对于悬浮细胞,采用半换液法和离心换液法也可有效处理。具体步骤包括轻轻吸掉3ml旧培养基并加入同等量的新培养基,或是通过离心使细胞沉淀后重悬并分瓶培养。
尊龙凯时的细胞冻存与复苏步骤也非常关键。在细胞生长至培养瓶表面80%时,弃去培养液并用PBS洗涤,随后加入胰蛋白酶消化液以终止消化处理。将细胞转移至离心管后进行离心,弃去上清,加1ml的无血清冻存液后混合均匀并装入冻存管。对于冻存细胞,储存于-80℃冰箱超过24小时,之后再转入液氮罐中是理想的保存方式。
细胞复苏时需快速解冻并用完全培养基重悬,再将细胞接种至培养瓶中。对于细胞运输及存档,注意细胞若在运输过程中出现脱落或污染,应根据具体情况及时与<强>尊龙凯时客服联系,提供相关实验结果以申请重发。
总之,在细胞培养中,良好的操作规范、适时检测及处理,以及遵循<强>尊龙凯时提供的指导原则,能够有效提高细胞的存活率及培养效果,为后续研究打下良好基础。