尊龙凯时的基质胶在3D细胞培养、类器官研究、肿瘤形成、细胞侵袭及血管生成实验中,扮演着重要的“支架”角色。然而,从解冻到铺板,从浓度选择到结果解析,若稍有不慎,实验可能会出现意外。通过整合数万次实验反馈,尊龙凯时为您提供这份“避坑指南”,助您快速掌握,获得优质实验数据。
产品保存建议
收到尊龙凯时产品后,建议将其存放于-20℃的环境;若需短期保存,可放置于4℃,但不宜超过7天。值得注意的是,不建议进行反复的冻融。首次解冻后,应立即分装(200µL/管),并在-20℃条件下保存。解冻操作可在冷冻状态下,前一天将基质胶埋入碎冰中,随后转移至4℃冰箱,次日可使用。适当延长在4℃的解冻时间,有助于减少基质胶中的气泡形成。
类型与特点
含酚红基质胶
常规实验均可使用含酚红的产品。酚红在不同温度及pH下会显现颜色变化,从明黄色至暗红色不等。
无酚红基质胶
涉及颜色检测的实验建议使用尊龙凯时的不含酚红基质胶。例如,在子宫内膜细胞培养中,应使用无酚红基质胶。此外,酚红被认为是一种潜在的内分泌干扰物,可能影响实验动物体内激素的自然生成及代谢能力。
标准与高浓度基质胶
标准蛋白浓度为8-12mg/mL,适合Transwell实验及皮下肿瘤实验。而高浓度蛋白(18-22mg/mL)则适用于凝胶3-5min且难以成瘤的细胞系,并可以在标准浓度基质胶基础上减生长因子,适合用于类器官培养和血管生成实验。
常见问题及解决方案
皮下肿瘤实验失败原因
肿瘤形成不成功的可能原因包括细胞处于对数生长期,密度应维持在80-90%;建议选择4-6周龄的裸鼠,小于4周可能不耐受,大于6周免疫力增强,可能不易成瘤。若出现免疫排斥,建议更换免疫缺陷程度更高的小鼠。接种后一周可补种一次,以提高成功率。
肿瘤消失原因
肿瘤长起后消失可能由于炎症反应,肿瘤细胞被小鼠自身吸收。如后续肿瘤仍未形成,建议更换免疫缺陷程度更高的小鼠。
血管生成实验问题
若细胞无法形成连续网格,建议使用代数达到3-5代且融合度为70%-80%的HUVEC细胞。细胞数量不足会导致无法形成连续网络,观察需每4小时检查一次。
侵袭实验中的细胞转移问题
若细胞侵袭转移能力弱,可能是细胞活性不足,使用胰酶消化后,需彻底洗去含血清的培养基。
类器官实验注意事项
类器官传代的标准时间因类器官类型而异,通常为7-14天(直径100-200um),有些发育较慢的类器官可能需数周。辨别类器官的方法可以通过显微镜观察形态及H&E染色,进一步可采用免疫荧光检测其是否表达相应的生物标志物。若观察到的形态与文献不符,可能是由于样本来源、细胞因子品质差异等多种因素导致。
产品信息
尊龙凯时提供多种规格的基质胶,如下:
- Ceturegel®Matrix LDEV-Free基质胶(货号:40183ES,规格:15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶(货号:40184ES,规格:15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix GFR,LDEV-Free基质胶(货号:40185ES,规格:15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix GFR,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶(货号:40186ES,规格:15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix High Concentration,LDEV-Free基质胶(货号:40187ES,规格:15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶(货号:40188ES,规格:15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free基质胶(货号:40189ES,规格:15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free基质胶(货号:40190ES,规格:15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶(货号:40191ES,规格:15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-FreePlus基质胶(货号:40192ES,规格:15mL/5mL/10mL)